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本文摘要:文章内容情况简述肠鳞状上皮细胞具有自身改版和造成分裂体细胞的工作能力,每3-5天再次出现一次更替,这类更替是被活跃性的循环系统干细胞群(其特点是具有Lgr5传递)所拓张的。

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文章内容情况简述肠鳞状上皮细胞具有自身改版和造成分裂体细胞的工作能力,每3-5天再次出现一次更替,这类更替是被活跃性的循环系统干细胞群(其特点是具有Lgr5传递)所拓张的。肠胃干细胞(又被称为作Lgr5+皱壁底材柱型体细胞或ISCs)以及细胞分裂子孙后代被嵌入在称之为皱壁的杯状构造中,而管腔磁感应状的毛绒基本上由分裂体细胞组成。营养成分调整和基础代谢操控在干细胞分子生物学中具有最重要的具有。

科学研究强调,肠胃干细胞(ISCs)对发热量允许和还包含脂肪酸、果糖、N-乙酰-D-葡萄糖胺和碳水化合物以内的膳食营养有着反映。先前科学研究强调,LGR5+体细胞特别是在依靠膜蛋白基础代谢。在ISCs中,脂肪酸水解必须性兴奋水解磷酸化。

这种科学研究强调,体细胞基础代谢是肠胃干细胞恒定的基本调整因子。殊不知,现阶段行远必自不准确肠胃干细胞特有的基础代谢情况是怎样建立的。因为脂肪酸β-水解(FAO)是多种多样的机构中干细胞维持的重要,因而了解ISCs根据FAO搭建自身改版的调节机制是有适度的。

肝细胞质因子4(HNF4)有一个激进派的配位结合区,必须与脂肪酸组成性结合在一起。HNF4a是基础代谢恒定的最重要调整因子,参与肝部脂类基础代谢遗传基因的mRNA。

与酰基-CoA基础代谢涉及到的遗传基因被确定为是HNF4a的靶标,HNF4a必须结合酰基-CoA融合蛋白和脂酰-CoA硫酯。肠胃干细胞与消化道疾病和癌病涉及到。了解肠胃干细胞(ISC)生理学管控体制对人们身心健康和重塑医药学具有最重要实际意义。

殊不知,管控ISC基础代谢的体制行远必自不准确。根据FAO在干细胞维持中的潜在性具有及其HNF4在调整脂类基础代谢全过程中的必要性,英国罗格斯大学新泽西州人们细胞生物学研究室、英国新不伦瑞克美国俄亥俄州罗格斯癌病研究室的LeiChen,RoshanP.Vasoya,NatalieH.Toke等科学研究了HNF2mRNA因子是怎样危害ISC基础代谢,及其HNF4依赖感的基础代谢调整是不是维持ISC所务必的。该科学研究于今年以“HNF4RegulatesFattyAcidOxidationandisRequiredforRenewalofIntestinalStemCellsinMice”问题公布发布在《Gastroenterology》杂志期刊上(IF2018=19.233,医药学1区)。

常用到的关键方式1.肠上皮细胞、毛绒和皱壁体细胞提取2.病理学和免疫染色3.qRT-PCR4.Westernblot5.类器官培养、记数、免疫荧光6.FAO特异性检验7.LC-MS剖析文章内容关键内容概述肠胃干细胞(ISCs)的作用不会受到饮食搭配和基础代谢方式的调整。肝细胞质因子4(HNF4)是结合脂肪酸的mRNA因子。创作者配搭Villin-CreERT2、Lgr5-EGFP-IRES-CreERT2、Hnf4af/f和Hnf4gCrispr/Crispr小鼠科学研究了HNF2mRNA因子的基础代谢调节机制及在小鼠ISCs中的作用。

创作者从肠胃提取皱壁和毛绒体细胞,用携带莹光标识的脂肪酸或果糖类似物孵育,随后根据总共讨论光学显微镜认真观察。检验Hnf4agDKO和对比小鼠近端结肠收集的体细胞中脂肪酸水解特异性和三羧酸循环(TCA)基础代谢物质。除此之外,创作者进行了染色质免疫沉淀和基因的表达谱分析,以确定不会受到HNF4因子管控的遗传基因;从十二指肠皱壁提纯类器官,用标识的棕榈酸酯或乙酸酯孵育,检验TCA基础代谢物质或脂肪酸的造成;还根据甲酸或二氯乙酸进行了基础代谢干预。

科学研究结果显示,皱壁体细胞必须迅速汲取携带标识的脂肪酸,再用FAO(脂肪酸β水解)缓聚剂Etomoxir孵育的类器官中,LGR5+干细胞标识物(Lgr5、Olfm4、Smoc2、Msi1和Ascl2)的mRNA水准被上涨,强调FAO是ISCs改版所务必的。HNF4a和HNF4g在ISCs和全部肠上皮细胞中都有传递。HNF4a和HNF4g的单基因敲除不危害ISCs的维持,但双基因敲除不容易导致ISC丢失,造成 干细胞没法重塑。FAO抵制ISC改版,HNF2mRNA因子必需基因表达Acsl5和Acsf2(编号长链脂酰CoA合酶)、Slc27a2(编号脂肪酸运送蛋白质)、Fabp2(编号脂肪酸融合蛋白2)和Hadh(编号甲基-CoA脱氢酶)等FAO遗传基因。

与对比小鼠相比,Hnf4agDKO小鼠肠上皮细胞FAO基因的表达水准、FAO特异性和TCA基础代谢物质皆显著降低,但脂肪酸制取mRNA物质降低。从双基因敲除小鼠肠胃提取的皱壁与甲酸或二氯乙酸共培养必须彻底恢复肠胃干细胞。

综合性来讲,在小鼠中,mRNA因子HNF4a和HNF4g不容易调整脂肪酸水解所需要遗传基因的传递,它是肠干细胞改版所务必的。


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